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HKE123系列 Reverse Transcriptase(逆轉(zhuǎn)錄酶)

英文名稱:Reverse Transcriptase

貨 號(hào) :HKE123系列HKE123

規(guī) 格 :10000U | 10000U×5

用途:1st Strand cDNA的合成

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產(chǎn)品名稱:Reverse Transcriptase
中文名稱:逆轉(zhuǎn)錄酶(反轉(zhuǎn)錄酶)

產(chǎn)品編號(hào)與包裝規(guī)格:

編號(hào)產(chǎn)品名稱規(guī)格產(chǎn)品介紹產(chǎn)品價(jià)格
HKE123-01AReverse Transcriptase10000U逆轉(zhuǎn)錄酶(反轉(zhuǎn)錄酶)645
HKE123-01B10000U×52870

產(chǎn)品描述:本制品是通過(guò)基因重組技術(shù)克隆表達(dá)M-MuLV的缺失突變型 RNase H-的反轉(zhuǎn)錄酶。一般的野生型M-MuLV(Moloney Murine Leukemia Virus)具有以下幾種活性:依賴于RNA的DNA聚合酶活 性;依賴于DNA的DNA聚合酶活性;RNase H活性。由于RNaseH 能夠催化降解 DNA/RNA雜合體中的RNA,因此在cDNA第一條鏈 的合成反應(yīng)中可能會(huì)降解RNA/DNA雜合體中的模板RNA。本酶的 RNase H活性缺失,延伸能力強(qiáng),可用于較長(zhǎng)的cDNA合成,高比 例的全長(zhǎng)cDNA文庫(kù)的構(gòu)建以及Real Time RT-PCR反應(yīng)等。

逆轉(zhuǎn)錄酶 產(chǎn)品用途:
      1) 1st Strand cDNA的合成;
      2) cDNA Probe的制備;
      3) RT-PCR反應(yīng)以及Real Time RT-PCR反應(yīng)。

保存溫度:-20℃。
      產(chǎn)品反應(yīng) Buffer 中含有高濃度的 DTT,低溫下或者凍融可 能會(huì)導(dǎo)致沉淀析出,請(qǐng)恢復(fù)至室溫并輕搖混勻后使用。

Reverse Transcriptase 產(chǎn)品包裝(A包裝):

逆轉(zhuǎn)錄酶產(chǎn)品包裝

逆轉(zhuǎn)錄酶 質(zhì)量保證:經(jīng)多次柱純化,SDS-PAGE 膠檢測(cè)僅可見(jiàn)清晰單一 目的條帶,PCR 方法檢測(cè)無(wú)大腸桿菌 DNA 殘留,無(wú)核 酸內(nèi)、外切酶污染,無(wú) RNA 酶污染。

反轉(zhuǎn)錄酶 活性定義:以Poly(rA)?Oligo(dT)為模板/引物,在37℃、10 分鐘條件下,摻入1 nmol的[3H] dTTP所需要的酶量定 義為1個(gè)活性單位。

反轉(zhuǎn)錄酶 操作方法與常用PCR循環(huán):

逆轉(zhuǎn)錄酶操作方法與常用PCR循環(huán)

使用Reverse Transcriptase 注意事項(xiàng):
      1) 用DEPC處理實(shí)驗(yàn)用到的所有實(shí)驗(yàn)器材,或者 購(gòu)買已經(jīng)證明無(wú)核酸酶的實(shí)驗(yàn)用具,實(shí)驗(yàn)過(guò)程戴手套 并經(jīng)常更換手套,避免RNA酶的污染。
      2) 確保所用試劑及超純水中無(wú)RNA酶污染。
      3) 純化過(guò)的RNA必須保證不含有鹽,金屬離子, 乙醇和苯酚,以上成分會(huì)干擾第一鏈cDNA的合成反 應(yīng)。可采用乙醇沉淀RNA的方法去除掉痕量污染物。
      4) 為保證反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)的有效進(jìn)行,需使用高質(zhì)量 的RNA模板。

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