細菌新型生化鑒定管使用說明
―― 071760 致瀉大腸埃希氏菌生化鑒定盒（5種×10次）
一）生化管的使用方法
開啟西林瓶前，用75%酒精棉消毒西林瓶表面，在無菌條件下，按鋁蓋上的箭頭方向打開鋁蓋，撕開鋁蓋，打開西林瓶膠塞（如圖1）。
所有的西林瓶在使用后均高壓滅菌后方可棄去。
注意：氰化鉀生化管，應盡量將塑帽套緊，以免氰化鉀揮發(fā)造成假陽性！
二）致瀉大腸埃希氏菌生化鑒定盒的詳細使用方法
致瀉大腸埃希氏菌僅是大腸埃希氏菌中的一小部分。挑取平板分離的可疑的菌落進行革蘭氏染色鏡檢，將疑是致瀉大腸埃希氏菌的新鮮菌苔置于已配備的無菌生理鹽水中，與0.5 McFarland的濁度管比濁，將菌懸液制備成0.5McFarland ( 約108cfu/mL )，用吸管吸取2滴（約0.06mL）菌懸液加入每種微量生化管內(nèi)。將已接種的西林瓶再套上膠塞，一般采用全加塞（如圖2左兩瓶所示），特殊情況在下表注明采用半加塞（如圖2右兩瓶所示），直立于內(nèi)托的凹槽內(nèi)（如圖2），或放置于合適的瓶架中，于35－37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，結果觀察見表1。
注意：如有特殊的接種方式、培養(yǎng)時間或培養(yǎng)方式，請詳見每種生化鑒定管附帶的使用說明。
三）致瀉大腸埃希氏菌生化鑒定特征 （詳見下生化鑒定程序圖）
1、致瀉大腸埃希氏菌生化鑒定程序圖：
2、血清學試驗
假定試驗：挑取經(jīng)生化試驗證實為大腸埃希氏菌的瓊脂培養(yǎng)物，用腸道致病性大腸埃希氏菌、腸道侵襲性大腸埃希氏菌和產(chǎn)腸毒素大腸埃希氏菌多價O血清和腸道出血性大腸埃希氏菌O157血清作玻片凝集。當與某一種多價O血清凝集時，再與該多價血清所包含的單價O血清作試驗。致瀉大腸埃希氏菌所包括的O抗原群見表2。如與某一個單價O血清呈現(xiàn)強凝集反應，即為假定試驗陽性。
證實試驗：制備O抗原懸液，稀釋至MacFarland 3號比濁管相當?shù)臐舛?。原效價為1：160～1：320的O血清，用0.5％鹽水稀釋至1：40。稀釋血清與抗原懸液再10mm×75mm試管中等量混合，做單管凝集試驗?；靹蚝蠓庞?0℃水浴箱內(nèi)，經(jīng)16h后觀察結果。如出現(xiàn)凝集，可證實為該O抗原。
