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如何更加準(zhǔn)確的測定培養(yǎng)基的pH值?

發(fā)布時間:2019-08-30    瀏覽次數(shù):7867

大多數(shù)的培養(yǎng)基的配方都是依據(jù)標(biāo)準(zhǔn)來做的,例如國家標(biāo)準(zhǔn)、藥典或者其他的國外標(biāo)準(zhǔn)。這些標(biāo)準(zhǔn)對培養(yǎng)基的pH值都有嚴(yán)格要求,一般都是控制在一個很小的范圍。所以pH值對于培養(yǎng)基廠家的質(zhì)量控制以及客戶對培養(yǎng)基的驗收,都是很重要的。

校準(zhǔn)

首先在測量pH值時,我們都會對pH計進(jìn)行一個校準(zhǔn)工作,它的校準(zhǔn)準(zhǔn)確率對后續(xù)的測量有很大影響。pH電極需要有規(guī)律的進(jìn)行校準(zhǔn)。每天至少校準(zhǔn)一次,是最恰當(dāng)?shù)摹?/p>

由于每支電極都有其特征性的零點和斜率,為了得到可靠和精確的結(jié)果,最少兩點校準(zhǔn)是必不可少的。當(dāng)要測量大范圍的pH值時,則需要進(jìn)行至少3點校準(zhǔn)。大多數(shù)的pH儀表可以進(jìn)行3-5點校準(zhǔn)。

同時所測量的樣品pH值落在所選擇標(biāo)準(zhǔn)液范圍之內(nèi)也是非常重要的。

在電極進(jìn)行校準(zhǔn)時,最好等待緩沖液溫度在標(biāo)示溫度下校準(zhǔn),這樣測出的pH值才是緩沖液標(biāo)示的值,比如pH 6.86和pH9.12的緩沖液是表示25℃下的pH值,那么你在20℃進(jìn)行校準(zhǔn),顯示的就不是6.86或者9.12。不過一般廠家都會附送一張緩沖液在不同溫度下測的pH值,下圖可以參考下。

標(biāo)準(zhǔn)pH計緩沖溶液對照表

用于校準(zhǔn)的緩沖液是非常精確的溶液,擁有固定的數(shù)值和精度。緩沖液瓶開封后,為了保證校準(zhǔn)的準(zhǔn)確性,要注意下面事項:

1. 第一次使用緩沖液時,在包裝上標(biāo)明日期,保證緩沖液包裝的密封性。 

2. 不要把使用過的緩沖液倒回原瓶,或把不同廠家的緩沖液混合在一起。 

3. 常溫下儲存緩沖液,儲存時避免陽光直射 

4. 校準(zhǔn)前請清洗電極,不要在原瓶中直接校準(zhǔn) 

5. 絕對不要使用過期的或污染的緩沖液 

6. 緩沖液到期應(yīng)及時更換新的緩沖液

培養(yǎng)基pH值的測量

培養(yǎng)基按形態(tài)可以分為固體培養(yǎng)基和液體培養(yǎng)基。液體培養(yǎng)基可以選擇普通液體的pH電極,固體培養(yǎng)基選擇對應(yīng)的固體pH電極,比如針對凝膠表面的平頭電極。如果固體培養(yǎng)基用液體的pH電極測量,得出的結(jié)果是沒有參考價值的。

首先在配置培養(yǎng)基的過程中,一定要注意配制用水一般用蒸餾水或者去離子水。否則可能對之后的pH值有影響。

其次,按照培養(yǎng)基廠家使用說明配置滅菌。一般培養(yǎng)基外包裝標(biāo)簽上的pH標(biāo)識表示滅菌后25℃測的pH值,所以液體培養(yǎng)基要待溶液溫度達(dá)到25℃時測量培養(yǎng)基的pH值,固體培養(yǎng)基等其凝固后再用專用的固體pH電極測量,同時測量的溫度也要在25度。

這里有些人可能會說我們的pH計有自動溫補(bǔ)功能,是不是可以不用等到25度就可以測量?

這里需要注意的是自動溫補(bǔ)功能只能補(bǔ)償電極本身,并不能補(bǔ)充待測溶液的溫度,所以培養(yǎng)基標(biāo)準(zhǔn)要求在25℃測量,那待測培養(yǎng)基溶液溫度就要控制在25℃左右再測。

維護(hù)

每次測量后用去離子水沖洗電極,切勿用紙擦拭電極。紙張粗糙的表面會刮劃并損壞pH敏感玻璃上的凝膠層,并且會在電極上產(chǎn)生靜電電荷。靜電電荷會導(dǎo)致測量信號非常不穩(wěn)定。

測量間隙或電極短時不用,電極需要儲存在盛有專用的電極儲存液,或電解液(如:3mol/L KCl)或緩沖液pH4或pH7的容器中。確保容器中電解液液面低于電極中填充液的液面。

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